小鼠体外受精及其胚胎体外培养的比较研究

更新时间:2023-08-14

【摘要】目的通过比较不同品系小鼠体外受精情况以及不同培养液对C57BL/6J小鼠胚胎体外培养效果的实验,进一步完善小鼠体外受精和早期胚胎体外培养体系。方法对C57BL/6J、DBA/2、FVB/NJ、BALB/c、KM、ICR及BARRⅡ小鼠进行超排和体外受精,并对C57BL/6J小鼠体外受精后的2-细胞胚胎用HTF、CZB、KSOM、M16、HECM五种培养液在相同条件下进行体外培养到囊胚,计算4-细胞～囊胚的发育率。结果各品系小鼠平均排卵数为13.0～38.7个(P<0.01),体外受精率为70.2%～92.8%(P<0.05)。不同培养液至4-细胞的发育率为60.3%～95.8%,其中KSOM的4-细胞发育率为95.8%,最适合2-细胞向4-细胞的发育。8-细胞发育率为52.8%～91.1%,桑椹胚发育率为40.6%～87.5%,囊胚发育率为5.1%～75.4%,各阶段胚胎发育率均差异显著。其中适合于金黄仓鼠桑椹胚、囊胚发育的HECM-2并不支持C57BL/6J囊胚的发育,其囊胚发育率只有5.1%,CZB最适合其囊胚的发育。结论遗传背景是影响小鼠超排及体外受精效果的主要因素之一。葡萄糖的存在不利于克服2-细胞发育阻断,胚胎在8-细胞期以前,主要能源物质不是葡萄糖,直到桑椹胚后期,葡萄糖才是主要的能量物质。磷酸盐可引起胚胎发育阻断。氨基酸和EDTA有利于克服胚胎发育阻滞。

【关键词】 小鼠 体外受精 胚胎体外发育

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